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                細胞培養常遇問題集錦(十)

                發布時間: 2021-12-03  點擊次數: 1584次

                今天為大家帶來細胞培養常遇問題的第十期,看看本期都為大家分享常遇的都有哪類型的問題,小編已為各位客官整理出來了~~來,上正片!


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                ▲問:昨天剛剛復蘇的細胞,今天出現這個情況,會是什么問題呢?那是不是因為凍存的時候就污染了呢?

                答:一片兒一片兒的,黑云彩一樣的,是霉菌污染。也有可能。

                 

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                ▲問:培養液是清亮的,高背景下看細胞也沒有異常,請問這是霉菌嗎?

                答:這個東西很常見,有可能是血清蛋白沉淀或培養耗材里的雜質。


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                ▲問:以上三圖霉菌污染怎么處理么呢?三抗一直在用沒有效果。而且會長的越來越多。代數低的是這樣。少數有,大多數沒有。

                答:這個細胞看起來老化得很嚴重呀。共用培養箱的其他人有這種污染嗎?可能環境有污染,沒得到*。

                 

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                ▲問:上面三個圖,三陰性乳腺癌細胞,細胞中間這些空泡是怎么回事呀,是細胞狀態不好嘛?

                答:細胞狀態看著還可以,空泡有可能是雜細胞或者細胞凋亡形成的。

                問:雜細胞為啥不是正常細胞(摻入的細胞)的形態呀?

                答:如果是MSC,間沖干里面的亮點細胞是分裂能力強的細胞,不是分化,分化不會發亮。也有可能雜細胞或者未貼壁細胞。

                問:就養兩種細胞,另一種用的同種培養基。

                答:還有一種可能,就是細胞有老化,老化的細胞形態會發生改變。這個細胞狀態沒問題,不用擔心。分辨是不是老化比較簡單,傳代的時候一瓶密度稍大一些,另一瓶密度稍微小一些,如果是老化,密度小的那瓶異形態細胞會比較多。如果細胞有老化現象,傳代的時候注意密度要稍微大一些。中間空泡可能是凋亡細胞。

                 

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                問:臍帶MSC原代培養有什么技巧???之前分離全被污染了。

                答:可用MSC無血清培養基消化法。

                問:之前用的是貼壁法呢?

                答:也可參考MSC無血清培養基組織塊法操作。

                問:整個培養皿都黏糊糊的,鏡下看都是污染了,沒看到細胞。

                答:原代加慶大霉素預防得好些。


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