提取純化產(chǎn)品冊---06 柱式DNA提取產(chǎn)品（DC202、DC203）

FastPure® EndoFree Plasmid Maxi Kit

質(zhì)粒大提試劑盒 (DC202)

內毒素含量極低，后續可做轉染級別實(shí)驗

產(chǎn)量高，高拷貝質(zhì)粒產(chǎn)量達到 0.2 mg-1.5 mg

操作簡(jiǎn)便

保存條件 : 試劑盒除 RNase A 和內毒素清除劑外，其他組分室溫保存；RNase A 保存于 -30℃ ~-15℃ ;  內毒素清除劑 2℃ -8℃可以保存一個(gè)月，長(cháng)期保存放 -30℃ ~-15℃ ▲ 若低溫保存，溶液容易產(chǎn)生沉淀。在使用前務(wù)必將試劑盒內的溶液在室溫中放置一段時(shí)間，必要時(shí)可在 37℃水浴鍋中預熱 10 min，溶解沉淀，混勻后再使用。

產(chǎn)品概述

本試劑盒適用于提取 150 ml-300 ml 過(guò)夜培養的菌液，采用改進(jìn)的 SDS- 堿裂解法裂解細胞，粗提物通過(guò)內毒素清除劑選擇性結合離心去除內毒素，然后離心吸附柱內的硅基質(zhì)膜在高鹽、低 pH 值狀態(tài)下選擇性地結合溶液中的質(zhì)粒 DNA，再通過(guò)漂洗液將雜質(zhì)和其它細菌成分去 除，最后用低鹽、高 pH 值的洗脫緩沖液將純凈質(zhì)粒 DNA 從硅基質(zhì)膜上洗脫。離心吸附柱內硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口世界著(zhù)名公司特制吸附膜， 柱與柱之間吸附量差異極小，可重復性好，克服了國產(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩定的弊端。不需要使用有毒的苯酚，氯仿等試劑，也不需要乙醇沉淀， 可快速提取 0.2 mg-1.5 mg 純凈的高拷貝質(zhì)粒 DNA，提取率達 80-90%。工藝配方清除內毒素，內毒素含量極低（<0.1 EU/μg DNA）， 細胞轉染效果非常好。也可直接用于酶切、PCR、體外轉錄、轉化、測序等各種分子生物學(xué)實(shí)驗。

性能展示

產(chǎn)量高

用 FastPure®  Endofree Plasmid Maxi Kit 試劑盒提取大小為 3.0 kb、 5.0 kb、5.9 kb、21.5kb 不同大小的質(zhì)粒，1% 瓊脂糖膠電泳檢測， M：DL15000 DNA Marker (Vazyme #MD103)。結果顯示本試劑盒 針對不同大小的質(zhì)粒均具有較好的提取效果，產(chǎn)量高。

純度高

使 用 FastPure®  Endofree Plasmid Maxi Kit 提取的 M3K 的質(zhì)粒 進(jìn)行酶切驗證，1% 瓊脂糖膠電泳檢測，M：DL5000 DNA Marker  (Vazyme #MD102)。結果顯示提取的質(zhì)粒純度高，對下游酶切反 應無(wú)抑制作用。

操作流程概要

適用范圍

本產(chǎn)品適用 150 - 300 ml 過(guò)夜培養的菌液，大規模提取質(zhì)粒。

組分

RNase A：10 mg/ml，用于去除 RNA； Buffer P1：細菌懸浮液，第一次使用前請將 RNase A 加入到 Buffer P1 中； Buffer P2：細菌裂解液（含 SDS/NaOH)； Buffer P4：中和液； 內毒素清除劑：可以有效去除質(zhì)粒粗提液中的內毒素； Buffer PW：洗滌液，第一次使用前請按說(shuō)明加一定體積的乙醇； Buffer TB：洗脫緩沖液； FastPure DNA Maxi Columns：質(zhì)粒 DNA 吸附柱； Collection Tube 50 ml：濾液收集管。

自備材料

無(wú)水乙醇，異丙醇，50ml高速離心管

△ Buffer PW 需在使用前添加一定量的無(wú)水乙醇

提取流程

FastPure® EndoFree Plasmid Mini Kit

高產(chǎn)無(wú)內毒，25 min 轉染級質(zhì)粒小提 (DC203)

產(chǎn)量高 提取效率高，質(zhì)粒 DNA 產(chǎn)量高達 50 µg
內毒素殘留量 內毒素殘留量 ≤0.1 EU/µg，下游可做轉染級別實(shí)驗

快速 無(wú)需冷熱交替，25 min 內即可完成提取

產(chǎn)品概述
本試劑盒適用于1 - 5 ml過(guò)夜培養的菌液，采用優(yōu)化的堿裂解法裂解細胞，通過(guò)硅膠膜吸附技術(shù)與特殊的溶液，可特異性結合質(zhì)粒并有效地去除內毒素、蛋白等雜質(zhì)，整個(gè)提取過(guò)程僅需 25 min。提取的質(zhì)粒 DNA 內毒素殘留低 (≤0.1 EU/μg)，可用于多種細胞的轉染及常規的分子實(shí)驗。

性能展示（產(chǎn)量高）

分別使用 Vazyme #DC203( 簡(jiǎn)稱(chēng) V) 與市售競品 (A、B、C、D、E、F、G、H、I)，按照各自流程提取 pUC57( 高拷貝 ) 和 M3K( 低拷貝 ) 的質(zhì) 粒，對提取產(chǎn)物進(jìn)行濃度測定 ( 圖 1A、B) 及跑膠檢測 ( 圖 1C、D)。結果表明，Vazyme #DC203 提取的質(zhì)粒產(chǎn)量高、完整性好。

分別使用 Vazyme #DC203( 簡(jiǎn)稱(chēng) V) 與市售競品 (A、B、C、D、E、F、G、H、I)，按照各自流程提取 pUC57( 高拷貝 ) 和 M3K( 低拷貝 ) 的質(zhì)粒， 對提取的產(chǎn)物進(jìn)行內毒素殘留量的測定 ( 圖 2A、B)。結果表明，Vazyme #DC203 提取的質(zhì)粒內毒素殘留量低，且優(yōu)于競品。

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