實(shí)時(shí)熒光定量PCR總述

第一章：實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 總述

一、實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 的概念

實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 即 Real-time PCR，利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監測整個(gè) PCR 進(jìn)程，最后通過(guò)C_T 值和標準曲線(xiàn)對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。

二、實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 的原理

A 化學(xué)原理

變產(chǎn)物DNA分子為熒光信號，通過(guò)測定熒光值即可反映產(chǎn)物 DNA分子量。

B 數學(xué)原理

通過(guò)循環(huán)數“n"(C_T 值 ) 來(lái)計算起始 DNA 量。

三、實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 方法的選擇

四、實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 的優(yōu)勢

比較不同樣品間某基因的“量"的方法：

實(shí)時(shí)熒光定量PCR的優(yōu)點(diǎn)：

(1)能夠實(shí)時(shí)監測PCR反應的進(jìn)程；

(2)具有更大的檢測范圍，能夠對樣本中的起始量進(jìn)行準確定量；

(3)在單管中同時(shí)實(shí)現擴增和檢測，無(wú)需PCR后處理。

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