轉染HGF-1牙齦成纖維細胞, 質(zhì)粒大小10646bp

1.可轉染極度難轉染的免疫細胞，懸浮細胞，如T細胞，NK細胞、人淋巴細胞、THP-1等;

2.可高效率轉染sirRNA、小分子到任何哺乳動(dòng)物細胞；

3.轉染細胞后可10小時(shí)內快速代謝的第三代新轉染試劑;

轉染條件：

細胞密度：60左右

質(zhì)粒DNA濃度：648ng/ul

質(zhì)粒DNA大?。?0646bp

培養板：6孔板

轉染試劑用量：8ul

質(zhì)粒DNA用量：電訊

轉染試劑：AD600150，Advanced DNA RNA轉染試劑

轉染時(shí)間：48小時(shí)

血清：z7010-500 胎牛血清

細胞凍存：CE70100T無(wú)血清細胞凍存液

細胞活力檢測：K009-500，cck8

重要指導方針：

-質(zhì)粒DNA必須溶解在ddH 2 O中。如果溶解在Buffer中，轉染效率會(huì )下降70%，甚至導致轉染失敗。

-質(zhì)粒DNA必須去內毒素，否則轉染效率會(huì )下降70%，甚至導致轉染失敗。

- 在制備轉染復合物時(shí)，不能使用其他試劑稀釋核酸或轉染試劑。只需將核酸和轉染試劑按照1:1的關(guān)系直接混合即可。否則，轉染效率將下降80%，甚至導致轉染失敗。

-檢查并與轉染試劑混合后，用移液管吹吸10-15次以充分混合，確保管壁無(wú)液體殘留。

- 將核酸與轉染試劑混合并在室溫下孵育至少 10-15 分鐘。

- 將復合物加入細胞培養板并輕輕混勻，將板置于 CO 2 培養箱中繼續培養。

- 在整個(gè)轉染實(shí)驗過(guò)程中，細胞可以在*培養基中培養，而不是使用無(wú)血清培養基。

- 如果轉染后顯微鏡下觀(guān)察到白色或黑色圓形顆粒，則為轉染試劑的新材料顆粒。