酵母和細菌蛋白質(zhì)的代謝放射標記的方法

1. 接種細胞于只含有必需氨基酸和輔因子的已知成分的基本培養基，于合適溫度中度振蕩培養過(guò)夜。

2. 用新鮮的基本培養基稀釋培養物，繼續溫育至 107 細胞/ml （酵母）或對數期中期（細菌）。

3. 5000 g 室溫離心 10 分鐘收集細胞，用無(wú)硫酸鹽基本培養基重懸至 107 細胞/ml（酵母）或 5X108 細胞/ml（細菌）。

4. 加 H235SO4 至終濃度 20 μCi/ml。于適宜溫度輕度振蕩培養 1 小時(shí)（酵母）或 20 分鐘（細菌）。

5. 5000 g 室溫離心 10 分鐘收集細胞，吸出培養基，倒入放射性廢料桶。

6. 用冰冷的基本培養基重懸細胞，如第 5 步離心收集細胞。將上清倒入放射性廢料桶。用巴氏滴管吸去離心管壁殘存的上清。